pmd19t载体通用引物　PMD19T通用引物序列

pmd19t载体通用引物

1、pmd-19 t载体用什么引物测序。应该是这一对M13 RV和M13 M4

2、proximity ligation assay 原理是什么？企业回Duolink PLA技术可通过同一个实验即可完成对蛋白质互作及其修饰的检测、定量以及确定细胞定位等。Duolink基于原位PLA技术（即邻位连接分析技术），可以帮助您在内源蛋白质表达过程中进行该分析。

3、哪个T载体上没有SacI和BamHI这两个酶切位点？Takara公司的pMD19T simple载体，货号为327T-Vector pMD19 (Simple) 是两侧的3’ 端添加了 “T” 的线性化载体，因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’ 末端添加一个 “A” 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆。

4、急啊！最近做TA克隆一直无法得到结果，涂完平板后长的斑很少，而且都是假。你用PMD19T simple试试，我一直都是用这个做的，效果还挺好的，这种载体消除了LacZ基因上的多克隆酶切位点，效果更好一些。

5、产生平末端的PCR产物可以进行TA克隆吗。1平末端的PCR产物，首先需要用普通的taq酶让其末端加上A（一般跑完PCR，直接加少量普通taq，72度继续20-30min，就行了，如果你不放心，可以纯化一下，然后按PCR体系加入taq，dATP，buffer等，72度，30min），然后和普通PCR产物一样进行TA克隆；2 具体的克隆方法，参考所用T载体的说明书。比如TAKAR。

PMD19T通用引物序列

1、急，如何构建原核表达载体。大体分为一下几步：设计目的片段引物（含限制性酶切位点，要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）PCR扩增片段 扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接，通过蓝白斑筛选，提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切，回收目的片段 目的片段与表达载体连接 转化到DH5a等。

2、简述重组载体构建的原理和步骤。大体分为一下几步：设计目的片段引物（含限制性酶切位点，要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）PCR扩增片段 扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接，通过蓝白斑筛选，提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切，回收目的片段 目的片段与表达载体连接 转化到DH5a等。

3、原核表达产物的鉴定方法。大体分为一下几步：设计目的片段引物（含限制性酶切位点，要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）PCR扩增片段扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接，通过蓝白斑筛选，提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切，回收目的片段目的片段与表达载体连接转化到DH5a等克隆。